目前常用的幾種elisa試劑盒白介素類方法有:測定抗體的間接法,測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實驗采用間接法測定單克隆抗體效價。其主要過程為:首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應板的凹孔內(nèi),加待測抗體,保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì),加酶標抗抗體,保溫后洗滌,加底物保溫30分鐘后,加酸或堿終止酶促反應,用目測或光電 比色測定抗體量。
ELISA試劑盒檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長一段時間,跟著自己技術(shù)水平得進步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現(xiàn)在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定??墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色。
①抗原包被:兔抗人IgG 作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。
②洗滌:次日傾去凹孔內(nèi)的液體,洗滌液洗3次。
③封閉:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h.
④洗滌:用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗):elisa試劑盒白介素類將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1:2或1:10),100μL /孔加到 已包被的板上,ELISA試劑盒每個樣品平行做兩份,PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌:用洗滌液洗3次。
產(chǎn)品名稱: Anti-CD138/Syndecan-1 規(guī)格: 0.1ml 多配體蛋白聚糖1抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD14 規(guī)格: 0.1ml CD14/內(nèi)毒素受體抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD14 規(guī)格: 0.1ml CD14抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD141 規(guī)格: 0.1ml 凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD144/VECD 規(guī)格: 0.1ml 上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD146/MCAM 規(guī)格: 0.1ml 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD147/EMMPRIN 規(guī)格: 0.1ml 細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導因子抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD147/EMMPRIN 規(guī)格: 0.1ml 單核-巨噬細胞基質(zhì)金屬蛋白酶抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD158a/KIR2DL1 規(guī)格: 0.1ml NK細胞抑制性受體2DL1抗體
elisa試劑盒白介素類