小鼠17羥皮質(zhì)類固醇elisa檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(mouse TARC)
小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(mouse TAT)
小鼠組織因子(mouse TF)
小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β1(mouse TGF-β1)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β2(mouse TGF-β2)
小鼠可溶性粒細胞靶受體(mouse sTREM-1)
小鼠端粒酶(mouse Telomerase)
小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)
小鼠Toll樣受體-4(mouse TLR-4)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)
小鼠腫瘤壞死因子-a(mouse TNF-a)
小鼠腫瘤壞死因子-b(mouse TNF-b)
小鼠腫瘤壞死因子-r(mouse TNF-r)
小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(mouse Transferrin)
小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(mouse TSLP)
小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)
小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR)
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)
小鼠血小板生成素(mouse TPO)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(mouse TRAIL/APO 2L)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體1(mouse TRAIL R1)
小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(mouse TM)
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)
小鼠血管細胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)
小鼠血管內(nèi)皮生長因子(mouse VEGF)
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)