濾紙酶可見分光光度法檢測(cè)試劑盒酶液提取:
1. 組織:按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,冰浴勻漿后于4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):蒸餾水體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測(cè)。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存。
濾紙條:50mg×50條。
測(cè)定原理
濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與3,5-二**水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在540nm處有最大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測(cè)定計(jì)算得濾紙酶的活力。
僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動(dòng)物的治療等任何其他用途,不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù)。