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兔核因子κB亞基p65親和肽 NF-κB p65 ELISA試劑盒 Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA試劑盒
更新時間:2024-08-17;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:583
兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒
7.斑點ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)(Dot-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)) 與常規(guī)的微量板ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)比較,Dot-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)具有簡便、節(jié)省抗原等優(yōu)點,而且結(jié)果可長期保存;但其也有不足,主要是在結(jié)果判定上比較主觀,特異性不夠高等。該方法的主要操作程序為:(1) 載體膜的預(yù)處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后,稍加干燥進行壓圈。將陰性、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中,置37℃使硝酸纖維素膜*干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點加40-53個樣品,每個壓圈可加抗原液1-20μl。 ?。?) 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中,37℃感作15-30分鐘。封閉液多采用含有正常動物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。 ?。?) 加被檢血清 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再加入一定量適度稀釋的待檢血清,37℃反應(yīng)一定時間,用洗滌液洗三次,每次1-3分鐘。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。 (4) 加酶標抗體,37℃反應(yīng)一定時間后,用洗滌液洗三次。 ?。?) 顯色 加入新鮮配制的底物液,37℃反應(yīng)一定時間后,去掉底物液,加蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。 (6) 結(jié)果判定 以陽性、陰險血清作為對照,膜片中央出現(xiàn)深棕紅色斑點者為陽性反應(yīng),否則為陰性反應(yīng)。
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